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家蝇幼虫壳聚糖对杨桃保鲜作用的研究.doc

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家蝇 幼虫 聚糖 杨桃 保鲜 作用 研究
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本科毕业论文(设计)家蝇幼虫壳聚糖对杨桃保鲜作用的研究二级学院 中药学院专 业中药学(中药分析与鉴定方向)班 级 2011 级(3)班学生姓名 刘晓芳学 号 1106503302指导教师 王艳2015 年 4 月诚 信 声 明我声明,所呈交的毕业论文(设计)是本人在老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我查证,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文(设计)中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。我承诺,论文(设计)中的所有内容均真实、可信。毕业论文(设计)作者(签名): 年 月 日目 录 摘要 ........................................................................................................................Ⅰ-Ⅱ1 前言 ..............................................................12 材料与仪器 ........................................................22.1 试剂和仪器 ......................................................22.2 实验动物、菌种及材料 ............................................33 方法 ..............................................................33.1 家蝇的饲养与幼虫的收集 ..........................................33.2 家蝇幼虫壳聚糖的提取及常数测定 ..................................33.3 家蝇幼虫壳聚糖的降解 ............................................53.4 家蝇幼虫壳聚糖对杨桃保鲜作用的研究 ..............................63.5 家蝇幼虫壳聚糖纸片法抑菌实验 ....................................84 结果 .............................................................104.1 家蝇幼虫壳聚糖的提取率 .........................................104.2 家蝇幼虫壳聚糖的吸附显色鉴别结果 ...............................104.3 家蝇幼虫壳聚糖脱乙酰度 .........................................104.4 家蝇幼虫壳聚糖分子量 ...........................................104.5 家蝇幼虫壳聚糖保鲜数据 .........................................104.6 家蝇幼虫壳聚糖纸片法抑菌结果 ...................................145 讨论 .............................................................16参考文献 ...........................................................18综述 ...............................................................21致 谢 ...........................................................29家蝇幼虫壳聚糖的提取及其保鲜作用的研究摘要:目的 本实验从家蝇幼虫提取壳聚糖,用木瓜蛋白酶降解得到可溶性壳聚糖。研究了家蝇幼虫可溶性壳聚糖对杨桃的保鲜效果以及其对四种细菌的抑菌作用;方法 本实验提取壳聚糖后,用木瓜蛋白酶降解,研究了家蝇幼虫可溶性壳聚糖对杨桃的保鲜作用,分为空白对照组、1%氯化钙阳性对照组、0.5%壳聚糖组、1% 壳聚糖组和 2%壳聚糖组,测定其重量,观察其成熟程度,9 天后捣碎取汁,测定其维生素 C 含量和总糖含量。研究了此三个浓度对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和伤寒杆菌的抑制作用;结果 家蝇幼虫壳聚糖的提取率约为 29.70%,木瓜蛋白酶降解可得到可溶性壳聚糖。家蝇幼虫可溶性壳聚糖对杨桃有一定的保鲜效果,1%壳聚糖保鲜效果最好,优于阳性对照。家蝇幼虫可溶性壳聚糖对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用,对伤寒杆菌没有抑制作用;结论 研究结果表明,家蝇幼虫可溶性壳聚糖对杨桃有保鲜作用,对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用。关键词:家蝇幼虫;壳聚糖;木瓜蛋白酶;保鲜;抑菌Study on the Extraction and Fresh-keeping of Chitosan From Larva of Housefly Abstract: Objective The experiment extracts chitosan from larva of housefly, degradation of soluble chitosan, to study its effect on Carambola fresh-keeping and its inhibitory effect on four kinds of bacteria. Method In this experiment, after extracting chitosan, it was degradation by papain to get soluble chitosan, and then studied its effects of preserving Carambola. The study was divided into five groups:blank group, 1%Calcium chloride of the positive control group, 0.5% chitosan group, 1% chitosan group and 2% chitosan group. Every day we measured their weight, observed their maturity, and after 9 days, we broken Caracalla to measure their content of Vitamin C and total sugar. Meanwhile we studied the effects of this three concentration of chitosan to inhibition Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus and Typhoid bacillus. Results The extraction rate of chitosan from larva of housefly is about 29.70% and papain can degradation chitosan to get the soluble chitosan. This soluble chitosan has certain effect on preservation of Carambola and 1%chitosan group is the best, which is good than the positive control group. This soluble chitosan also has the ability to inhibition Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus but not to Typhoid bacillus. Conclusion The research shows that the soluble chitosan from larva of housefly has good effect on preservation of Carambola and has inhibitory effect on Escherichia coli, bacillus coli and Staphylococcus aureus.Keywords: larva of housefly; chitosan;papain; fresh-keeping; microbial inhibition01 前言甲壳素是由 2-乙酰氨基-2-脱氧-D- 葡萄糖的基本单元经 β-(1,4)连接而成的聚合物,而壳聚糖则是甲壳素脱乙酰基的产物,又名几丁聚糖、聚氨基葡糖等,其化学结构为带阳离子的高分子碱性多糖聚合物,是至今为止唯一发现的阳离子动物纤维和碱性多糖 [1]。壳聚糖为类白色无定形、无味无臭的物质,具有很强的吸湿性、良好的成膜性、透气性和生物相容性,目前已作为酶载体、免疫吸附剂和缓释制剂等应用于医药领域,作为絮凝剂和皮革整理剂应用于化工环保领域,作为果汁澄清剂和食品添加剂应用于食品工业领域 [2]。壳聚糖的制备原料主要来源于水产加工厂废弃的虾壳和蟹壳,通过酸碱法、酶法制得。现如今海洋生物逐渐减少,且不同种类的虾蟹提取壳聚糖的工艺不同,造成了壳聚糖的成本过高,限制其广泛应用。家蝇(Musca domestica)属于昆虫纲(Insecta),双翅目(Diptera),家蝇科(Muscidae),是分布最普遍的家蝇类,在我国大部分地区随处可见,虽然其生命周期短,但具有非常强大的繁殖能力,一般半个月就可完成一个世代。家蝇幼虫又名五谷虫,具有清热、消滞的功效,用于神昏谵语、小儿疳积等症。已有研究表明,家蝇幼虫壳中的甲壳素含量高达 95%,约是虾蟹壳的 6 倍,是潜在的丰富的壳聚糖来源 [3]。家蝇幼虫来源丰富,其壳聚糖含量更比废弃的虾蟹壳高,加上其壳聚糖的提取工艺较为单一,而且已有实验研究证明其壳聚糖安全无毒,因此是潜在且丰富的壳聚糖资源,应用前景非常广泛。目前,对家蝇幼虫壳聚糖的研究多集中于降血压、降血脂方面,在保鲜方面的研究相对较少。杨桃产于热带亚热带,脆甜多汁,具有很高的营养价值,可清热生津、利水解毒。杨桃果实皮薄、脆、具棱状、易损伤,采摘后容易腐烂,其保鲜技术目前主要是打蜡处理、聚乙烯袋包装和低温保存。这些技术或不卫生或成本太高,所以寻找更安全价低的保鲜技术很有必要。本实验的目的主要是研究家蝇幼虫可溶性壳聚糖对杨桃的保鲜作用,为家蝇幼虫壳聚糖应用于杨桃保鲜提供参考依据。12 材料与仪器2.1 试剂和仪器表 2-1 仪器与材料名称 型号 厂家雀巢全脂甜奶粉 Q/SCQC0015S 黑龙江双城雀巢有限公司纯红糖 QB/T2343.1 普宁市里湖恒丰食品厂碘化钾 分析纯 天津市风船化学试剂科技有限公司碘 分析纯 广州化学试剂厂盐酸 分析纯 广州化学试剂厂氢氧化钠 分析纯 天津市百世化工有限公司冰乙酸 分析纯 天津市百世化工有限公司无水乙醇 分析纯 天津市富宇精细化工有限公司可溶性淀粉 分析纯 广东台山粤侨试剂塑料有限公司氯化钙 分析纯 天津市百世化工有限公司浓硫酸 分析纯 广州化学试剂厂葡萄糖 分析纯 广州化学试剂厂木瓜蛋白酶 规格:100 万 u/g 上海蓝季科技发展有限公司青霉素 规格:100 万单位 哈药集团制药总厂链霉素 规格:100 万单位 深圳华药南方制药有限公司乌氏黏度计 0.5-0.6mm 上海华科实验器材有限公司可见光分光光度计 721 型 上海精密仪器有限公司气浴恒温振荡器 ZD-85A 江苏金坛市宏华仪器厂超净工作台 ZHJH-C1209C 上海智诚分析仪器制造有限公司
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