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不同炮制工艺对款冬花中的款冬酮影响的研究.doc

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不同 炮制 工艺 款冬花 中的 款冬 影响 研究
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本科毕业设计不同炮制工艺对款冬花中的 款冬酮影响的研究二级学院 中药学院专 业 中药分析与鉴定班 级 2011 级(3)班学生姓名 林剑峰学 号 1106503308指导教师 田素英2015 年 4 月诚 信 声 明我声明,所呈交的毕业论文是本人在老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我查证,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。我承诺,论文中的所有内容均真实、可信。毕业论文作者(签名): 年 月 日目 录摘要 ............................................................Ⅰ-Ⅱ1 前言 ..............................................................12 材料与仪器 ........................................................32.1 材料 ............................................................32.2 仪器 ............................................................33 方法与结果 ........................................................43.1 蜂蜜的炼制 ......................................................43.2 甘草水的煎煮 ....................................................43.3 正交试验因素 ....................................................43.4 款冬花的炮制 ....................................................53.5 醇溶性浸出物 ....................................................53.6 款冬酮的提取与含量测定 ..........................................54 结果 ..............................................................74.1 方法学考察结果分析 ..............................................74.2 蜜炙款冬花结果分析 .............................................104.3 甘草制款冬花结果分析 ...........................................115 讨论 .............................................................125.1 提取方法的确定 .................................................125.2 流动相比例的确定 ...............................................125.3 不足之处 .......................................................12参考文献 ...........................................................13综述 ...............................................................14致谢 ...............................................................21附录 A 蜜炙款冬花样品高效液相色谱图 ...............................22附录 B 甘草炙款冬花样品高效液相色谱图 .............................26不同炮制工艺对款冬花中款冬酮影响的研究摘要:目的 对不同炮制工艺的款冬花中的款冬酮的影响进行研究,优化款冬花的炮制工艺。方法 通过正交试验方法,以款冬酮、醇溶性浸出物为考察指标,优选款冬花的炮制工艺。结果 蜜炙款冬花最佳工艺为:加蜂蜜的量为30%,炒制时间为 11min,闷润的时间为 3h,甘草制款冬花最佳工艺为:甘草用量为 6%,浸泡时间为 14h,烘干温度为 70℃。 结论 本实验工艺简单,稳定可行,材料易得,可用于款冬花的工业化生产。关键字:款冬花;款冬酮;炮制工艺;醇溶性浸出物Different processing technology on the research on the effects of coltsfoot ketone coltsfoot flowerAbstract: objective this topic in the theory of traditional Chinese medicine and traditional Chinese medicine theory,under the guidance of the different stir-baked process coltsfoot ketone of coltsfoot flower were studied,the influence of optimizing the processing technology of coltsfoot flower. Methods the orthogonal test method and the method of multi-index comprehensive evaluation,the processing technology of determining coltsfoot flower. First of all,according to the orthogonal experiment design processing coltsfoot flower,then extracted by the method of ultrasonic extraction coltsfoot ketone,then using high performance liquid chromatography (HPLC) to determine the coltsfoot ketone content; Second is according to the 2010 edition of China pharmacopoeia method in each group after processing the coltsfoot flower alcohol soluble extract,and its content is calculated,finally integrated the two measures,it is concluded that the best processing technology. Results honey coltsfoot flower optimum process for: honey 20%,making time for 6 min,boring time for 2 h,licorice coltsfoot flower optimum process is: licorice dosage was 7%,the soaking time for 14 h,drying temperature is 70 ℃. Conclusion this study extraction process is simple and reasonable,stable and feasible,can be used in the industrial production of coltsfoot flower. Keywords: Tussilago farfara L,orthogonal test, processing technology01 前言款冬花(Tussilago farfara L)是菊科植物的干燥花蕾。药材味清香,有苦味 [1]。其主要产区为山西,河南,陕西,甘肃等地,是传统常用中药,具有止咳,润肺下气的功效,在《本经》中记载:对“寒束肺经之饮邪喘、嗽最宜”。气味温,润而不燥,则温热之邪,郁于肺经而不得疏泄者,亦能治之,故外感内伤、寒热虚实的咳嗽,皆可应用。特别是肺虚久咳不止,最为适用。款冬花中主要含有倍半萜,三萜,绿原酸,黄酮,生物碱,笨二甲酸酯,脂肪酸及其酯和挥发性物质。根据现代医学研究,款冬花具有使呼吸兴奋,心率增快,升高血压的功效,能对血管具有收缩的作用,同时对血小板活化因子引起的血小板聚集具有抑制的作用;除此之外,还具有抗氧化,抗炎,抗肿瘤,放大瞳孔,增加泪腺分泌的作用 [2]。蜂蜜具有润肺之功效,而款冬花中润肺止咳的主要成分为款冬酮,故使用蜜制的方法可以增强款冬花的润肺止咳的功效。蜜制法,是传统而历史悠久的一种炮制方法,在中药蜜炙出现之前,已经有了蜂蜜单方要用和参与配伍使用的记载了。在蜜制中草药的时候,一般选择中华蜜蜂或者意大利蜜蜂在蜂巢中所酿的糖类物质,蜂蜜中主要含有葡萄糖,果糖,以及其他多种生物活性物质[3].在蜜制中药的时候,因为蜂蜜中所含的杂志较多,所以并不是直接使用蜂蜜,而是经过炼制,炼制蜂蜜可以追溯到《本草经集注》,里面记载了“炼”或“煎”两种方法 [4],炼制后的蜂蜜一般分为:嫩蜜,中蜜,老蜜三种,根据蜂蜜炮制的中药或使用用途而决定使用哪一种蜂蜜,同时《雷公炮炙论》中也记载了炼蜜的标准“凡炼蜜一斤,只得十二两半,或一分是数。若火少,火过,并用不得”。随着中国医家的发展,蜜制法也在不断的演变,在最初为蜜煎,如《金匮要略》中的大乌头煎使用的便是蜜煎的方法,然后唐代医术《食疗本草》中记载了蜜煮的方法;《雷公炮炙论》中记载了蜜蒸、蜜浸、蜜焙,这三种方法都是前两种方法发展而来,最后就是现在常见的蜜炙的方法了 [5],而在实际的操作中,又有先伴蜜后加药,先炒药后加蜜,先蜜润后炒药等不同。古代医家炼蜜炮制中药的目的多为增强润肺止咳作用,如蜜炙款冬花,如《医家四要》中桔皮“治痰咳蜜水炒”;抑或增强补益作用,如甘草蜜炙后能够增强温中的效果;也可缓和药性或降低毒性,如蜜炙香附后可以降低其燥性,蜜炙1麻黄可以降低其发散的功效;亦或者减少其0不良作用,如《本草从新》中的升麻,常用蜜水炒之。因此中药炮制技术从来不是一成不变,它会随着人们不断的探索和研究,不断有新的方法涌现出来,在治疗的实际应用之中不断地得到检验并代替原来旧的方法。本实验主要研究不同炮制工艺对款冬花中款冬酮含量的影响,从而优选出最佳的炮制工艺,为规范款冬花的炮制工艺提供了依据,同时探讨了甘草炮制款冬花这一新的炮制方法,为款冬花的炮制提供了新的思路。12 材料与仪器2.1 材料款冬花(Flos Farfarae),广州康圣药业有限公司,批号 20140401);甘草(Radix Glycyrrhizae,广东恒祥中药饮片有限公司,批号 20121126)(以上药材经实验中心田素英老师的鉴定符合 2010 年版中国药典的要求);95%乙醇(AR,江苏强盛化工有限公司,批号:2014806);甲醇(CR,天津四友精细化学品有限公司,批号:20140523);款冬酮对照品(中国生物制品所);超纯水(实验室自制) 蜂蜜(阳春市,永宁镇,2014 年 3 月 10 日)2.2 仪器JA2003-电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司);CO225 型电子天平(分度值:0.01mg,德国 Sartorius 公司);KQ-500 型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);SHZ-D(Ⅲ)型循环水式多用真空泵(巩义市英峪华仪器厂);GZX-9240 型电热鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司);有机系微孔滤膜(0.45µm,津腾有限公司);DG230-4 在线脱气机(大连依利特分析仪器有限公司);LU230 低压梯度洗脱器(大连依利特分析仪器有限公司);P230 高压恒流泵(大连依利特分析仪器有限公司);UV230+紫外-可见检测器(大连依利特分析仪器有限公司);EC2000 工作站(大连依利特分析仪器有限公司)23 方法与结果3.1 蜂蜜的炼制取蜂蜜 180.000g 置锅中,加清水 216.000mL,加热至沸腾后改用文火,保持微沸,除去泡沫及上浮蜡质后趁热用三层纱布过滤,滤液再置锅中煮沸,炼至起鱼泡眼时,用手捻之有黏性,两指间尚无长白丝出现时,即取出装入容器中备用 [6]。3.2 甘草水的煎煮取适量甘草,加 100.000mL 水,煎煮 3 次,保持微沸,每次煎煮 30min,集合煎煮液,然后过滤再使用,在煎煮过程中第一次煎煮使用冷水,第二、三次使用开水 [7]。3.3 正交试验因素影响蜜炙款冬花炮制工艺的主要因素主要有加蜜量、炒制时间、闷润时间,本次实验采用 L9(3 4)正交试验设计(表 3-1),以款冬酮的含量,醇溶性浸出物为考察指标,对其工艺水平参数进行优选。表 3-1 蜜制款冬花炮制工艺的正交实验因素水平水平 加蜜量(%-A) 炒制时间(min-B) 闷润时间(h-C)1 20 6 22 30 11 33 40 16 4本次炮制工艺的因素是参考文献 [8]设定的,影响甘草制款冬花炮制工艺的主要因素有甘草的用量、浸制的时间,烘干温度,本次实验采用 L9(3 4)正交试验设计(表 3-2),以款冬酮的含量,醇溶性浸出物为考察指标,对其工艺水平参数进行优选。
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